Главная » Подвывихи » Анализ кала на наличие хеликобактер. Как можно сдать анализ на хеликобактер пилори, подготовка к сдаче Кал на хеликобактер методом пцр

Анализ кала на наличие хеликобактер. Как можно сдать анализ на хеликобактер пилори, подготовка к сдаче Кал на хеликобактер методом пцр

Положительный результат анализа кала на хеликобактер служит достоверным доказательством заражения человека. Исследование относится к прямым видам, когда выявляется конкретный возбудитель или его ДНК, а не последствия его воздействия или продукты распада (как при проведении иммунологических анализов крови).

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность - отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Проведение анализа кала не связано с присутствием пациента, достаточно своевременной доставки в лабораторию испражнений. Это особенно важно для обследования детей.

Существуют разные методики выявления Helicobacter pylori, каждая обладает своими достоинствами и недостатками.

Лечащий врач определяет необходимость и выбор способа исследования. Немалое значение имеет доступность анализа для конкретного пациента из-за цены. Большая часть выполняется только в частных клиниках и лабораториях, поскольку требует дорогостоящего оборудования.

Цель исследования - выявление причинной связи заболевания с хеликобактер и назначение целевого курса лечения для избавления от возбудителя.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

оксидаза,
уреаза,
каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Симптомы поражения желудка, вызванные хеликобактерией, могут быть минимальными или соответствовать клинике обострения заболевания. У пациента наблюдаются:

вздутие живота;
отрыжка;
изжога;
болевой синдром, особенно при обострениях весной и осенью;
запоры или поносы;
чувство тяжести в эпигастрии;
снижение аппетита;
резкое падение веса.

Показаниями к исследованию могут быть:

необходимость проверки перед длительным курсом терапии нестероидными противовоспалительными лекарствами, ингибиторами протонной помпы, поскольку они снижают выработку соляной кислоты в желудке;
признаки железодефицитной анемии;
неясная тромбоцитопения;
возможность заражения членов семьи;
контроль проведенного курса антибиотикотерапии;
выяснение связи с генетической предрасположенностью.

У ребенка о признаках заражения говорят жалобы на тошноту, неясные боли в животе, плохой аппетит и отказ от еды, частое обильное срыгивание, а также вздутие и урчание живота.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя - микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

посев должен проходить без доступа кислорода;
можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа - выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования - сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант - первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным - 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза - фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
атрофическом поражении слизистой желудка;
полипах;
опухолях желудка;
выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
контроле за результатами терапии антибиотиками.

высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
простоту проведения;
безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

Недостатки исследования:

не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
сравнительно высокая стоимость;
необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования - дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.

При бактериологическом исследовании:

выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
если количество микроорганизмов больше нуля - подтверждается хелибактериоз;
знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
R - указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
I - чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

1 степень - наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах - роста нет;
2 степень - вырастает до 10 колоний;
3 степень - число выросших колоний достигает 100;
4 степень - распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.

Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный - при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Как подготовиться к сдаче анализа?

Где можно сдать анализ, укажет врач. Он же должен ознакомить пациента с правилами забора материала и подготовки. Некоторые частные клиники выдают посетителям напечатанную инструкцию «Как сдавать анализы». От соблюдения указанных условий зависит результативность исследования.

Общими правилами забора фекалий на выявления хеликобактер являются:

прекращение приема антибактериальных средств за трое суток до анализа;
контрольную сдачу анализа кала проводят через месяц после окончания курса лечения;
некоторые анализы требуют за три дня до исследования перейти на диету без продуктов с пищевой клетчаткой, исключить соленья, алкогольные напитки;
запрет на использование слабительных препаратов, ректальных свечей, если лечение требует ежедневного приема, нужно предупредить врача;
собирать кал нужно в чистую лабораторную посуду (выдается в клинике или покупается в аптеке), желательно отбор проб производить из трех точек;
непригодным считается кал с примесями слизи, гноя, крови, мочи;
доставка материала в лабораторию должна быть обеспечена в первые 2 часа, при необходимости разрешается хранить в холодильнике не более суток при температуре от 2 до 8 градусов.

Специальный набор для забора кала на анализ можно приобрести в аптеке

Дополнительные исследования

Пациент при диагностике не должен настаивать на изолированном исследовании кала. Используя дополнительные виды, врач повышает достоверность информации о заражении хеликобактерией.

Большой популярностью пользуются уреазные дыхательные тесты.

Проведение иммунологических исследований сыворотки крови может быть порекомендовано в случае необходимости дифференциальной диагностики формы поражения.

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Фиброгастроскопическая картина самой слизистой с характерными эрозиями, атрофией, изъязвлением указывает на косвенные признаки присутствия возбудителя в желудке. Рентгенологическая диагностика также позволяет по нарушениям в направлении складок, контуров желудка судить об органической патологии, вызванной хеликобактерией.

По итогам анализов врач может ввести пациента в группу риска с повышенной вероятностью заболевания язвой желудка, злокачественными опухолями. Предварительное применение специфического лечения позволяет снизить степень риска. При выборе медицинского учреждения для выполнения исследований на платных условиях нужно посоветоваться по поводу репутации и ответственности его сотрудников.

Helicobacter pylori, антиген

Helicobacter pylori антиген – один из показателей инфицирования бактерией Helicobacter pylori, способствующей образованию пептических (вызванных действием пищеварительных соков) язв в желудке или двенадцатиперстной кишке.

Синонимы русские

Антиген H. Pylori, антиген возбудителя хеликобактериоза.

Синонимы английские

Helicobacter pylori antigen test, Helicobacter pylori Ag, HpSA.

Метод исследования

Одностадийный иммунохроматографический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Хеликобактериоз – это широко распространенное инфекционное заболевание с оральным, фекально-оральным и контактным путем передачи возбудителя, сопровождающееся преимущественным поражением антрального отдела желудка, двенадцатиперстной кишки. Источником инфекции является больной человек или бактерионоситель, а наиболее чувствительны к ней люди с иммунодефицитами. Инкубационный период составляет около семи дней.

Возбудителем инфекции является Helicobacter pylori – спиралевидная грамотрицательная бактерия, способная инфицировать желудок и двенадцатиперстную кишку. Однако Helicobacter pylori вызывает лишь предрасположенность к гастриту и язвенной болезни, и только при дополнительных факторах – группе крови О(I), наследственной предрасположенности, курении, злоупотреблении алкоголем, приеме ульцерогенных лекарственных препаратов, частых стрессах, неполноценном питании – возникает язвенный дефект.

В настоящее время доказано, что хеликобактерная инфекция повышает риск рака желудка. Более половины населения в мире являются носителями Helicobacter pylori, однако у большинства носителей нет никаких симптомов, и лишь примерно у 15 % из них возникает гастрит или язвенная болезнь.

Определение антигена бактерии в кале является высокочувствительным и специфичным методом диагностики хеликобактериоза. Этот тест малоинвазивен, прост в применении, его специфичность и чувствительность – около 90 %.

Для чего используется исследование?

Для диагностики хеликобактерной инфекции.

Для определения показаний к назначению антихеликобактерной терапии и оценки ее эффективности.

Когда назначается исследование?

При жалобах, позволяющих заподозрить язвенную болезнь, гастрит или дуоденит: при дискомфорте в эпигастральной области, расстройстве пищеварения, чувстве тяжести в желудке, вздутии живота, изжоге, необъяснимых потерях веса, тошноте, рвоте.
Когда нужно проследить эффективность антихеликобактерной терапии и выявить возможный рецидив.
Когда необходимо подтверждение полной ликвидации инфекции.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

Инфицирование Helicobacter pylori (соответственно, высокий риск развития язвенной болезни, гастрита, дуоденита или уже имеющееся заболевание, повышенный риск развития рака желудка).

Отрицательный результат

Инфицирования Helicobacter pylori нет.

Важные замечания

Если при отрицательном результате теста у пациента есть симптомы язвенной болезни желудка или двенадцатиперстной кишки, гастрита, дуоденита, рекомендуется через 2 недели повторить данный анализ или же провести другие исследования на Helicobacter pylori.

Положительный результат теста через неделю после проведенного курса лечения может говорить о его неэффективности, а отрицательный результат через 4 недели свидетельствует о полном уничтожении инфекции.

Helicobacter pylori, IgA (количественно)
Helicobacter pylori, IgG (количественно)
Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, терапевт, инфекционист, педиатр, хирург.

Сдавать анализ на хеликобактер пилори можно несколькими способами: сдать кровь или кал на анализ, провести дыхательный тест. Нужна тщательная подготовка.

Иногда человек может и не подозревать, что в его организме уже обитают эти бактерии, пока толчком к развитию заболеваний не станут стрессы, неправильное питание, злоупотребление спиртным, курение и т.д. Согласно статистике, более 70% людей старше 40 лет являются носителями хеликобактер пилори, но у инфицированных не наблюдаются симптомы заболеваний.

Если же человек ослаблен, то бактерии начинают стремительно размножаться, выделяют токсины, которые, накапливаясь в большом количестве, поражают слизистую оболочку внутренних органов. Сначала появляются воспаления. Если ничего не делать, вскоре возникнут эрозии или язвы, могут дать о себе знать и опухоли.

Анализ на хеликобактер пилори может сдать любой желающий, но врачи назначают его тем, кто уже страдает от язвы желудка или двенадцатиперстной кишки, гастрита или же, если эти бактерии были найдены у одного из членов семьи (проживающим вместе с ними), или же у близкого родственника выявили рак желудка.

Также лечащего врача могут насторожить следующие симптомы, при наличии которых от попросит сдать анализ на хеликобактер:

Пациент мучается от тяжести в желудке.
Ему тяжело усваивать белковую пищу, т.е. есть мясо.
У него появилась изжога, метеоризм, отрыжка, часто тошнит, рвет.
Болит желудок, боли стихают, если человек поел.
Пациент жалуется на нарушение аппетита или же на затрудненное глотание.
Человек сильно похудел.
У него постоянные запоры или же понос.

Как сдавать анализы

Вы решили сдать анализ на наличие бактерий Хеликобактер пилори. Как это сделать, как подготовиться к анализу?

Прежде всего, нужно знать, что есть несколько способов это сделать, и лучше надеяться не на один из них, а провести хотя бы 2 исследования.

Расскажем о каждом виде обследования и о подготовке к нему.

Анализ крови

Врач может попросить вас сдать анализ крови, чтобы посмотреть, есть ли в ней антитела к хеликобактер пилори.

Наш организм борется с инфекцией и вырабатывает специальные антитела, которые связываются с возбудителем болезни, чтобы нейтрализовать его. Если в крови пациента есть эти антитела, то можно говорить о том, что он заражен. Анализ крови сдается утром, кровь собирают из локтевой вены.

Подготовка к нему стандартная, но все же не мешает о ней напомнить:

Нельзя принимать лекарства и употреблять спиртные напитки за 2 дня до сдачи анализов.
Перед тем, как идти в лабораторию, нельзя заниматься спортом или ходить в баню.
Перед сдачей анализа не стоит есть жирные и острые продукты.
Нужно избегать стрессов, беречь себя, не нервничать.
Кровь на анализ хеликобактер пилори надо сдавать натощак, т.е. последний прием пищи должен быть накануне вечером. Утром нельзя завтракать, даже пить сок, кофе или чай, а также курить.

Уреазный дыхательный тест

Бактерия Хеликобактер пилори синтезирует уреазу, это особый фермент. Он может влиять на мочевину, расщепляя ее на углекислый и аммиак в отделах кишечника. Проводя исследование, смотрят, какая концентрация этих веществ в выдыхаемом воздухе до приема мочевины и после нее. Расскажем более подробно, как проводится дыхательный тест на хеликобактер пилори.

Сначала пациент дышит через специальную трубку. Не стоит волноваться и переживать, дыхание должно быть таким же, как и в обычной жизни. После того, как были получены результаты, человеку предлагают выпить раствор карбамида (5%). Необходимо подождать 5 минут, а потом снова взять пробу.

Чтобы определить, заражен человек или нет, необходимо проверить концентрацию аммиака в выдыхаемом воздухе. Если она достаточно высокая (более 0,5 мг/мл), то тест – положительный. Чтобы тест был правильным, в трубку не должна попадать слюна. Если не получается ее сглатывать, то можно иногда вытаскивать трубку.

В случае попадании слюны придется повторить обследование.

Как подготовиться к исследованию:

Нельзя принимать препараты, которые понижают кислотность желудочного сока. Стоит от них отказаться за 3 недели до обследования. Это антацидные средства, антибиотики и т.д.
На время придется забыть об алкогольных напитках. Не стоит их принимать как минимум за 3 дня до обследования.
За день до того, как вы пойдете сдавать анализ, нельзя есть продукты, которые способствуют газообразованию: черный хлеб, капусту, горох, картошку и т.д.
Проходить тест надо натощак, перед этим ужинать легкой пищей.
До того, как обследоваться, т.е. утром, нельзя курить и завтракать.
За сутки не жевать жевательную резинку, которая способствует сильному слюноотделению.

Как мы видим, подготовка к тесту не сложная, но ее лучше начать заранее.

Анализ кала

Чтобы определить, есть ли в организме бактерии хеликобактер пилори, можно сдать анализ кала. Перед тем, как сдавать кал на анализ, за 3 дня до того, как вы будете собирать материал, необходимо отказаться от красящих веществ и пищевых волокон, нельзя принимать лекарства от запора.

После заражения микроб появляется во многих средах организма. Так что становится возможным анализ на хеликобактер пилори по биохимии крови, слюне, калу и так далее. Вопрос об этом решается по наличию соответствующих возможностей у местной лаборатории. Анализ крови на проводится с целью выявить наличие антител IgG и некоторых других комплексов, формируемых под действием антигенов (CagA и другие). Расшифровка анализа ведётся по таблицам. Так норма в крови этих веществ известна.

Золотым методом у медиков считается вовсе не анализ крови на хеликобактер пилори. Рекомендуется сделать биопсию с последующим посевом образца на питательные среды. Это как результативный анализ хеликобактер, так и путь для определения чувствительности культуры к лекарственным препаратам.

В сыворотке быстро формируются антитела к хеликобактер пилори. Картина характеризуется количественным изменением интелейкинов:

Повышение числа IL-6, 8 и 10.
Снижение количества IL-2.

Однако в исследованиях, проведённых на подростках, обнаружено несоответствие картин у детей и взрослых. С 14 до 17 лет у людей не зафиксировано количественного изменения цитокинов. Подростки сдали кровь на хеликобактер, и не выявилось никаких различий по содержанию интерлейкинов, факторов некроза и интерферонов.

Что такое цитокины

Цитокины пока ещё недостаточно изучены, так что диагностика в этом плане носит скорее предположительный характер. О чем и было сказано выше. Медики пока ещё выясняют соотношения между понятиями хеликобактер пилори, анализ крови, норма и цитокины.

Описываемые структуры представляют собой белковые комплексы, формируемые как ответ иммунной системы. По конфигурации цитокины близки к гормонам, а функции их пока что не изучены. Вот некоторые предположения на этот счёт:

Контроль за производством клеток крови и их дифференцированием.
Балансировка иммунной системы.
Регулировка процессов воспаления.
Поддержание нормального давления крови и её свёртывания.

Цитокины сегодня постоянно пополняются новыми представителями класса. Медики делят их на классы следующим образом:

Интерлейкины.
Интерфероны.
Хемокины.
Монокины.
Лимфокины.
Колониестимулирующие факторы.

Когда велось исследование новой тогда ещё инфекции хеликобактер пилори, медики обнаружили в цифрах повышенный фон IL-1 бета и IL-6 (на слизистой, а не в крови). Со временем стало ясно, что неадекватные реакции иммунной системы, которая отказывается бороться с инфекцией и постепенно переключается на аутоиммунные реакции, обусловлены формируемыми цитокинами. Указанные вещества проникали в цитоплазму клеток и межклеточное вещество.

Вот почему сегодня положительный анализ крови расшифровывается, как источник проблем в области сердечно-сосудистой системы, кожных заболеваний, анемии и других. При в первую очередь фиксируется снижение уровня факторов некроза опухоли альфа, IL-8 и IL-1 бета.

Не все штаммы провоцируют подобные изменения, а те, которые содержат антиген CagA. IL-8 – провокатор воспаления в организме.

Антитела

Когда медики столкнулись с проблемой замены биопсии ввиду сложности проведения процедуры, то выдумали сонм иных методик. Исследования на антитела в крови относятся к этому разряду. Анализ считается неинвазивным, хотя проводится при помощи шприца. Первоначально исследование на антитела напоминало то, что проводится для кампилобактера. Посредством перекрёстной реакции антигенов медики решали вопрос о присутствии их в сыворотке крови.

Что касается исследований на специфические факторы, например, CagA, то было вынесено решение о нецелесообразности такого подхода из-за плохой чувствительности.

Наличие IgG не указывает на присутствие инфекции. Удаётся обнаружить при анализе этот фрагмент в течение продолжительного времени. Из-за резкого снижения носителей инфекции в развитых странах удаётся определить наличие IgG у тех, кто давно уже получил негативный статус присутствия микроба.

Постепенно титры антител падают. Требуется парный анализ (до и после лечения), чтобы понять, каков диагноз. Потому единые цифры не удаётся выявить для отдельно взятого пациента. Снижение титров длится десятилетиями. Сегодня медики предлагают оценивать успех лечения по 50% снижению за 6 месяцев. Этот признак отличается повышенной чувствительностью (97%) и специфичностью (95%).

Сегодня тесты на иммуноглобулины IgA и IgM не одобряются в развитых странах. Поскольку показатели достоверности желают лучшего.

Прочие маркеры присутствия инфекции

Помимо морфологических признаков, регистрируемых инструментальными методиками (гастрит, язва и так далее), выделяют клинические признаки, как например, сильный голод. Это обусловлено биохимическим составом крови – повышенным уровнем гастрина. Слабоположительный прирост уровня пепсиногена рассматривается как фактор риска развития язвы. Однако этот фактор указывает не на формирование заболевания, а выявляет в крови маркер присутствия хеликобактера.

Сначала этот признак отнесли к генетически заложенному в организме человека. Поскольку то же характерно при аутоиммунном гастрите. Однако повторный анализ ситуации показал, что бактерия – причина. Так что медики уровень пепсиногена и гастрина в крови считают весомым доводом в пользу выставляемого диагноза. Так при росте соотношения пепсиногенов I и II на 25% пора уже присмотреться. Фурута сообщает о специфичности этой методики в 90% случаев и чувствительности – 95%.

Гипотеза проверялась путём оценки титров IgG после лечения инфекции. Через 2 недели после излечения медики зафиксировали снижение гастрина. Однако, чтобы сдать тест крови по этой методики, придётся выполнить его дважды с интервалом 6-12 месяцев.

Анализ результата

Результат оценивается, например, по той сумме, которую дают антитела к хеликобактер (иммуноглобулины А, М и G):

0,8 – суммарные показатели указывают на негативный ответ о наличии диагноза.
0,8 – 1,1 – требуется дополнительное исследование.
Свыше 1,1 – значит, что в желудке локализована инфекция.

Исследования кала

Бактерия обнаруживается в испражнениях, так что анализ кала на хеликобактер – неотъемлемое исследования на бактерию. Однако стул анализируется на антиген. В США (штат Цинциннати) уже разработан комплект количественной оценки кала на наличие нужных молекул.

В основу заложен иммуноферментный анализ, чувствительность которого к антигену составляет 185 нг/мл. Подготовка сильно напоминает то, о чем было написано выше в отношении проб крови. На антитела из состава оборудования осаждаются антигены (посредством белковых механизмов идентификации). Однако это не даёт представления о том, как лечить инфекцию. То, что антиген в кале, показывает наличие бактерии в желудке.

Поликлональные антитела, связанные с пероксидазой, и пробу инкубируют в течение 1 часа. Затем материал наносится на лунки и выдерживается 10 минут. Связанный фермент изменяет цвет, регистрируемый спектрофотометрическими методами. Для фиксации результата (чтобы остановить процесс) добавляют стоп-раствор.

Результат по достоверности сравним с гистологическим исследованием биопсии. Медики даже не берутся сказать, какой самый точный. Однако ошибки (5%) все-таки встречаются. С биопсией это случается реже.

Медики обратили внимание на зависимость качества ингредиентов, поставляемых вместе с набором, а также значение профессионализма сотрудников лаборатории. Реактивы получают из подопытных кроликов, и стандартизация сильно осложнена из-за недостатка знаний о нужных технологиях.

Исследование кала по результативности сравнивается с тестом дыхательным. Этим путём проводится определение достоверности результатов, полученных по крови.

Методики оценки присутствия инфекции

Помимо того, как сдаётся анализ, как берут пробу, выделяют пути оценки нужных параметров. Выше приведены сведения о биохимических и иммуноферментных разновидностях. Но точный – ПЦР. Это клонирование участков ДНК при помощи специальных реакций, что позволяет обнаружить бактерию.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции. Это мешает правильно понять результаты. К тому же, некоторые участки ДНК схожи с теми, что выявлены у других бактерий (которых в испражнениях много). Поэтому тест в этом случае не считается оптимальным, а стоит дороже, нежели дыхательный.

Однако ПЦР позволяет быстрее обнаруживать мутации ДНК, обусловливающие резистентность класса к тем или иным медицинским препаратам. Так что достоверность отходит на второй план перед перспективами, открывающимися исследователям (в научном, а не клиническом смысле).

Общие инструкции по выбору

Из сказанного понятно, что одно обследование дополняет другое. Они не альтернатива друг другу. Проверяйтесь по той и другой методике, чтобы правильно диагностировать заболевание. Этим методы дополняют собой .

По большей части оба применяются уже после лечения для оценки успешности эрадикации. С целью определения титра, где повышен эффект присутствия антител. Если речь идёт о диагностике, то сдаётся в лаборатории кал. Поскольку так обнаруживается присутствие микроба в ЖКТ. Что касается крови, то наилучшие результаты получаются при двух разнесённых по времени пробах. Что далеко не во всех случаях уместно.

Чаще делается всё-таки дыхательный тест, который люди иной раз сдают в домашних условиях. А кровь при необходимости берётся медиками в клинике. Проверенным случаем считается тот, когда при ФГДС проводится взятие биопсии с последующим высеванием на питательную среду. Лучше пока что ничего не придумано.

А рассматриваемые виды – вспомогательные методики. Если речь идёт об экспресс-анализе, исследование кала помогает уточнить диагноз. Если о лечении – состояние крови характеризует результативность эрадикации. Желающим определить наличие микроба лучше начинать с дыхательного теста, как безобидного и простого в реализации.

Helicobacter pylori, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Выявление Helicobacter pylori (H. pylori), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала.

Синонимы русские

Хеликобактер [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени].

Синонимы английские

H. pylori, Helicobacter pyloridis, DNA .

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, кал.

Общая информация об исследовании

H. pylori – это грамотрицательная подвижная бактерия, устойчивая к воздействию соляной кислоты и способная колонизировать слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Как правило, первичное инфицирование происходит в детстве и протекает бессимптомно, но у некоторых людей с течением времени приводит к развитию серьезных заболеваний. H. pylori обнаруживается в подавляющем большинстве случаев гастрита и язвенной болезни и, кроме того, многократно увеличивает риск развития аденокарциномы и В-клеточной лимфомы желудка. Современная диагностика этих заболеваний невозможна без точной и быстрой идентификации H. pylori.

H. pylori может быть выявлена с помощью нескольких методов. В настоящее время доступны неинвазивные методы диагностики, обладающие преимуществом простоты и безопасности взятия образца для исследования (исследование кала), что имеет особое значение при обследовании пожилых людей, детей, а также в условиях амбулатории.

Helicobacter очень чувствительна к воздействию желчных кислот и пониженного содержания кислорода, поэтому при пассаже химуса через двенадцатиперстную и толстую кишку количество бактерий значительно снижается. Кроме того, активные спиралевидные формы бактерии претерпевают морфологические изменения, обеспечивающие большую устойчивость в неблагоприятных условиях. Результатом этого становится низкая концентрация микроорганизмов и преобладание кокковых форм в кале, что следует учитывать при выборе лабораторного метода исследования этого биоматериала. Среди многих неинвазивных методов особое место занимает исследование с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Полимеразная цепная реакция в реальном времени (РТ-ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в кале) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. РТ-ПЦР характеризуется очень высокой чувствительностью (93-95 %), что является преимуществом при анализе кала. В отличие от бактериологического посева, это исследование позволяет выявлять как спиралевидные, так и кокковые (некультивируемые) формы H. pylori. Из-за того что в реакции выявляется ДНК микроорганизма, исследование не применяется для дифференциальной диагностики текущей инфекции или инфекции в анамнезе – результат анализа будет положительным еще некоторое время после полной эрадикации H. pylori, что обусловлено выявлением фрагментов разрушенных ДНК микроорганизма.

На слизистой оболочке желудка могут также присутствовать другие представители рода Helicobacter (H. suis, H. baculiformis). Несмотря на то что их значение в развитии заболеваний ЖКТ еще до конца не установлено, они играют определенную роль при идентификации H. pylori. Так, например, лабораторные исследования, основанные на выявлении общего для всех видов Helicobacter антигена, будут характеризоваться большим числом ложноположительных результатов исследования на H. pylori за счет выявления других видов (как в случае с ELISA). Это практически исключено в исследовании с помощью РТ-ПЦР, так как реакция основана на выявлении специфического для H. pylori фрагмента ДНК.

Диагностика хеликобактериоза у детей представляет определенные трудности. Это связано с невыполнением ребенком дыхательного маневра при использовании уреазного дыхательного теста, а также необходимостью наркоза при использовании инвазивных методов. Исследование кала с помощью РТ-ПЦР является хорошей альтернативой этим методам и поэтому может быть с успехом применено в педиатрической практике.

Высокое содержание неорганических солей (фосфатов, кальция), ферментов ЖКТ, полисахаридов, желчных кислот и солей, растительных волокон, слизи и других компонентов кала может ингибировать РТ-ПЦР, поэтому подготовка к тесту требует должного внимания со стороны пациента и врача. Интерпретация результата анализа проводится с учетом дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний, вызванных H. pylori:

атрофического или антрального гастрита;
язвы желудка и двенадцатиперстной кишки.

Когда назначается исследование?

При подозрении на гастрит или язвенную болезнь у детей и пожилых людей.
При невозможности использования инвазивных методов идентификации H. pylori у пациентов любого возраста.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

текущая H. pylori-инфекция;
H. pylori-инфекция в анамнезе.

Отрицательный результат:

отсутствие H. pylori-инфекции.

Что может влиять на результат?

Присутствие в образце кала крови, желчи, избытка неорганических солей и других компонентов может приводить к получению ложноотрицательного результата.
Лечение препаратами тетрациклина, пенициллина (аминопенициллины), макролидами (кларитромицин, азитромицин) и метронидазолом может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Важные замечания

Напечатать